Elisa樣本要怎么樣采集和保存
點擊次數(shù):518 更新時間:2022-09-26
Elisa樣本要怎么樣采集和保存,小編給大家做一個簡單的講解,希望能幫助到各位,在Elisa實驗中,標本的采取和保存極為關(guān)鍵,如果標本沒保存好,或者在采集的過程中污染了,必將會影響到實驗的結(jié)果,在Elisa實驗過程中,大部分ELISA檢測樣本均以血清為標本,可是血清標本的采集方法和保存方法有的客戶卻模糊不清。
如果是血清標本,一般可按常規(guī)方法采集,但是在采集的過程中應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
另外血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG聚合,使間接法的試劑本底加深。
超過一周測定的的elisa血清樣本需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫?yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當防腐劑??鼓?的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。